植物葉片全氮含量的測定方法
作者:祎鴻儀器 點擊率: 發布時間:2017-11-12 14:20:00
植物葉片是多年生常綠木本植物,僅憑經驗難以準確掌握植株的營養狀況,必須同時進行樹體營養診斷分析,才能做到準確判斷樹體營養水平,實現定量、高效、平衡施肥。氮是植物需求量最大的礦物質營養元素,同時也是植物個體乃至自然生態系統和人工生態系統(包括農業系統)生長最常見的限制因子。氮素是作物生長的重要營養元素之一,通過測定不同區域、不同部位和不同程度的植物葉片葉片中氮的含量,可以監測土壤營養的動態變化,從而達到高效施肥與高效利用肥料的目的,也可以為研發推廣植物易缺乏營養元素的高效增補措施和開發專用多元素平衡肥料提供實驗依據。
1 實驗部分
1.1 植物葉片葉片氮含量的測定方法 本實驗采用國家標準方法凱氏定氮法,以硫酸銅和硫酸鉀作為催化劑,加入濃硫酸消解植物葉片葉片樣品,用全自動凱氏定氮儀來測定氮的含量。
1.2 實驗原理 全氮的測定采用凱氏消解方法,用硫酸銅和硫酸鉀作為催化劑,加入濃硫酸消煮,在高溫下將植物葉片葉片中的含氮化合物轉變為硫酸銨,然后用氫氧化鈉堿化,加熱蒸餾出氨,經硼酸吸收后,用鹽酸標準溶液滴定而計算全氮量。反應原理如下:
(NH4)2SO4+2NaOH→Na2SO4+2H2O+2NH3↑;
NH3+H3BO3→NH4H2BO3;
NH4H2BO3+HCl→H3BO3+NH4Cl。
計算系統根據下列公式計算含氮量:
N(%)=14.01×C ×(V-VO)/1000W
式中:C=標準酸濃度(mol/L);
W=樣品質量(g);
VO=空白樣滴定標準酸消耗量(mL);
V=樣品滴定標準酸消耗量(mL)。
1.3 實驗儀器及試劑
1.3.1 儀器 pH計;電子分析天平;電熱鼓風干燥箱;凱氏消解儀;全自動凱氏定氮儀;
1.3.2 試劑 硫酸鉀與硫酸銅質量比為10∶1混合催化劑;濃硫酸(AR);400g/L NaOH溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑;20g/L硼酸溶液;0.0400mol/L 1/2 NaB4O7標準溶液;1mol/L鹽酸溶液;0.04mol/L鹽酸標準溶液。
1.4 樣品處理
1.4.1 植物葉片葉片樣品采摘 在果樹東南西北方向上的上中下各部位各摘取10~20葉片,混合裝入保鮮袋中。
1.4.2 植物葉片葉片樣品制備 為了確保葉片營養不損失,采摘的葉片樣品宜在24h內制備好或放在4℃左右的冰箱里存放。植物葉片葉片制備分為清洗和烘干2個部分:(1)清洗:將葉片依次放在0.1%的洗潔劑溶液、自來水、0.2%鹽酸溶液、自來水里清洗,最后用蒸餾水洗凈,整個過程不宜超過2min;(2)烘干:將洗凈的葉片平鋪在托盤里,放進烘箱,在105℃殺青30min,之后在65℃連續烘24h。烘好的樣品經粉碎機粉碎,裝入密封樣品袋里中備用。
1.4.3 消解 用減量法稱取烘干后制備樣品0.2g(精確到0.000 1g),用紙槽送入到消解管底部,然后加1.0g混合加速劑,搖勻,再加入5mL濃硫酸,混勻。將消解管放在石墨消解槽中,開電源,打開冷凝水源,調溫,一般150℃預熱約1h,后調溫至400℃消解1.5h(為不至讓溫度升值過快,過高,可以先調溫到380℃左右,后再升至400℃保持1.5h),待消解管冷卻后取出,以供氮的測定。
1.5 全氮測定 將各試劑分別裝入凱氏定氮儀中相應的試劑桶中。測定過程為:打開儀器電源,開冷凝水,儀器初始化;測定前放一空定氮管在儀器置管架上,且應盛有少量的水。然后手動調試,依次進行加堿,加硼酸,蒸餾,滴定,排液。
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